無(wú)血清細(xì)胞凍存液(凍存步驟)
1、常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。
2、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。
3、將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,1000rmp,5 分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,徹底棄去離心管中的上清液。
4、加入適量的HATAKA無(wú)血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度約為 5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞,制成細(xì)胞混合液。
5、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中,建議每管 1ml 或 1.5ml。
6、直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長(zhǎng)期冷凍保存。
7、如果想液氮中長(zhǎng)期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時(shí)間,方可移至液氮罐中保存。


無(wú)血清細(xì)胞凍存液(復(fù)蘇步驟)
1、從冰箱中取出凍存的細(xì)胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 細(xì)胞培養(yǎng)基于冷凍管中與細(xì)胞混合,加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩加入到細(xì)胞沉淀,輕柔地混勻,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。
3、鏡檢細(xì)胞后,可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。


無(wú)血清細(xì)胞凍存液 質(zhì)量保障
HAKATA無(wú)血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞凍存液經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的內(nèi)毒素、滲透壓、病原體和 pH 檢驗(yàn),確保產(chǎn)品不含病菌、病毒以及支原體等。用于常規(guī)的細(xì)胞凍存,-80℃可長(zhǎng)期保存(>5 年),細(xì)胞存活率在90-98%。
注意事項(xiàng)
HAKATA無(wú)血清細(xì)胞凍存液在凍存細(xì)胞分裝后,應(yīng)減少在外存放時(shí)間,盡快移入到-80 ℃超低溫冰箱。
對(duì)于干細(xì)胞(ES 細(xì)胞)等凍存時(shí),我們建議用戶在使用前,事先對(duì)所凍存的胞進(jìn)行至少為期1周的該產(chǎn)品試驗(yàn)性細(xì)胞冷凍保存培養(yǎng),確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。
本品含有 10%DMSO,部分對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞,建議對(duì)其進(jìn)行至少1周的本產(chǎn)品試驗(yàn)性的細(xì)胞凍存培養(yǎng),確認(rèn)性能后再正式凍存。