無血清細胞凍存液(凍存步驟)
1、常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。
2、根據培養細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數。
3、將所需數目的細胞懸浮液置于離心管中,1000rmp,5 分鐘離心收集培養細胞沉淀,徹底棄去離心管中的上清液。
4、加入適量的HATAKA無血清細胞凍存液細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度約為 5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細胞,制成細胞混合液。
5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中,建議每管 1ml 或 1.5ml。
6、直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。
7、如果想液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時間,方可移至液氮罐中保存。


無血清細胞凍存液(復蘇步驟)
1、從冰箱中取出凍存的細胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 細胞培養基于冷凍管中與細胞混合,加入適量的新鮮細胞培養基,使用移液管緩緩加入到細胞沉淀,輕柔地混勻,將細胞混合液移至事先準備好的培養容器中。
3、鏡檢細胞后,可根據各自研究的需要和方法經行細胞常規培養。


無血清細胞凍存液 質量保障 HAKATA無血清細胞凍存液細胞凍存液經過嚴格的內毒素、滲透壓、病原體和 pH 檢驗,確保產品不含病菌、病毒以及支原體等。用于常規的細胞凍存,-80℃可長期保存(>5 年),細胞存活率在90-98%。
注意事項 HAKATA無血清細胞凍存液在凍存細胞分裝后,應減少在外存放時間,盡快移入到-80 ℃超低溫冰箱。 對于干細胞(ES 細胞)等凍存時,我們建議用戶在使用前,事先對所凍存的胞進行至少為期1周的該產品試驗性細胞冷凍保存培養,確認性能后再進行正式凍存。 本品含有 10%DMSO,部分對 DMSO 敏感的細胞,建議對其進行至少1周的本產品試驗性的細胞凍存培養,確認性能后再正式凍存。 |