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◆ 產品簡介
蛋白電泳經常使用聚丙烯酰胺凝膠(PAGE 凝膠)來實現蛋白分離,此類凝膠一般由濃縮膠和分離膠兩部分組成,前者起到將蛋白樣品進行濃縮的作用,后者則是根據凝膠所使用的丙烯酰胺單體和 N,N-亞甲基雙丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交聯劑的濃度不同從而分離不同大小范圍的蛋白質。
本產品常溫運輸,保存于 4℃,過硫酸銨(APS)在使用前需用純水溶解,0.1gAPS 溶于1ml 純水中。使用本產品凝膠制備試劑操作簡單,只需加入過硫酸銨即可凝膠,配制一塊或多塊凝膠最少只需 2 分鐘的動手操作時間。本試劑盒所配制凝膠只能用于變性 PAGE 凝膠電泳,該規格可配制約 50 塊 mini 膠(以 1.0mm 厚度膠計算)。
◆ 產品內容
貨號:WBNJ-50 貨號:WBNJ-100
分離膠 A 液(2X)125ml 分離膠 A 液(2X)250ml
分離膠 B 液(2X)125ml 分離膠 B 液(2X)250ml
濃縮膠 A 液(2X)50ml 濃縮膠 A 液(2X)100ml
濃縮膠 B 液(2X)50ml 濃縮膠 B 液(2X)50ml
過硫酸銨 0.5g(使用前先溶于 5ml 純水中) 過硫酸銨 0.5g(使用前先溶于 5ml 純水中)
◆ 產品特點
1. 快速制備凝膠——最少只需 2 分鐘的動手操作時間即可灌制多塊凝膠,無需計算所需溶液量,無需稀釋。
2. 條帶清晰,適用范圍廣——可用于 10-250KDa 之間的分子條帶,分離蛋白分子量范圍廣,蛋白質分率高。
3. 電泳時間快——設置150V恒壓,利用Quick-P快速蛋白電泳緩沖液(10×)(PC-Biotech,PWQ001)電泳完成只需30min左右。
◆ 制膠流程 (以一塊 0.75/1.0/1.5 mm 的 mini 膠為例)
1. 取等體積分離膠 A 液和分離膠 B 液混勻,即取兩種溶液各 2.0/ 2.5/ 3.8 ml。
2. 往步驟 1 中的混合溶液中加入 40/ 50/ 76μl 的過硫酸銨溶液,混勻。
3. 將步驟 2 中的溶液注入制膠玻璃板中,加入適量水或醇(如乙醇、正丁醇等)覆蓋于分離膠之上。
4. 待分離膠凝固后(約 10min左右),倒去上層水或醇。
5. 取等體積濃縮膠 A 液和濃縮膠 B 液混勻,即取兩種溶液各 0.8/1.0/ 1.5 ml,加入 16/ 20/30μl 的過硫酸銨溶液,混勻。
6. 注入制膠玻璃板中,插入梳齒。
7. 待濃縮膠凝固后(約 10min左右),拔去梳齒即可用于電泳。
◆ 注意事項 :
1. 過硫酸銨溶液的使用量僅作參考,實際用量可根據個人實驗習慣和經驗增加或減少。加入較多量的過硫酸銨可加快凝膠速度,反之亦然;
2. 凝膠速度與溫度有顯著的正相關性。同等條件下,溫度越高,凝膠速度越快,室溫過高時建議適當減小過硫酸銨的用量;相反,如果室溫較低,可適當延長凝膠時間;
3. 在配膠之前,使分離膠和濃縮膠溶液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘),可有效避免凝膠中氣泡的形成;
4. 本產品在 Tri-Gly 電泳系統和 MOPS 電泳系統中均可適用,推薦使用 MOPS 電泳系統;
5. 本產品推薦電泳條件為:150-200V 之間,如需要加快電泳速度,可增加至 300V;
6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;
7. 本產品僅限科研使用。